NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)生化測試試劑盒
簡要描述:產(chǎn)品名稱:NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)生化測試試劑盒測定意義:Ca++ Mg++-ATP酶廣泛分布于植物、動物、微生物和細胞中,可催化ATP水解生成ADP和無機磷。產(chǎn)品規(guī)格:100T/48S產(chǎn)品形狀:盒裝液體保存條件:4℃有效期:6個月檢測方法:微量法 研究領域:神經(jīng)生物學,新陳代謝,免疫學,其它研究運輸:快遞送貨上門,運輸保存條件苛刻產(chǎn)品可單獨送貨上門
- 產(chǎn)品型號:ML160019
- 廠商性質:生產(chǎn)廠家
- 更新時間:2023-03-28
- 訪 問 量:702
NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)生化測試試劑盒
測定原理:
根據(jù)Ca++ Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及無機磷,通過測定無機磷的量來確定ATP酶活性高低。
需自備的儀器及用品:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體100mL ×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入6mL蒸餾水充分混勻待用;
試劑三:液體2mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存。用時加入3mL雙蒸水, 4℃保存。
試劑五:粉劑×1瓶, 4℃保存。用時加入25mL雙蒸水,溶解后4℃保存一周。
試劑六:粉劑×1瓶, 4℃保存。用時加入25mL雙蒸水,溶解后4℃保存一周。
試劑七:液體25mL×1 瓶,室溫保存。
試劑八:10mmol/L 標準磷貯備液 10mL×1 瓶,4℃保存。
0.5μmol/mL 標準磷應用液配制:將試劑八 20倍稀釋,即取0.1mL試劑八加1.9mL蒸餾水充分混勻。
定磷劑的配制:按H2O: 試劑五:試劑六:試劑七=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷劑應為淺黃色。若無色則試劑失效,若是藍色則為磷污染,定磷劑現(xiàn)用現(xiàn)配。
注意:配試劑最好用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
樣品酶液的制備:
1、細菌、細胞或組織樣品的制備:
細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照每500萬細菌或細胞加入1mL提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。
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